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在動物基因表達調控的研究中。報告基因也被廣泛應用。常用的有氯霉素乙酰轉移酶基因cat、β-半乳糖苷酶基因lacz、二氫葉酸還原酶基因、熒光酶基因等。cat基因作為報告基因，檢測時可通過放射自顯影觀察。熒光酶基因作為報告基因，具有檢測速度快、靈敏度比cat基因高301000倍、費用低、不需使用放射性同位素等優點，得到了廣泛的采用。

可通過報告基因的表達，研究蛋白質與蛋白質之間的相互作用。雙雜交體系是由報告基因轉錄調控區、報告基因及一對可以相互作用的雜合反式作用因子組成。來從上述雜交體系中發展出的單一雜交體系技術，也是根據報告基因表達量的檢測篩選出與已知順式作用元件相結合的未知因子的dna，該項技術正廣泛應用于克隆細胞中含量微弱且用生化手段難以純化的反式作用因子。

由此可知，報告基因在基因表達調控和基因工程研究中處于非常重要的地位。它是作為外源目的基因能否轉化植物體的探路先鋒而首先被研究的，在研究植物的基因表達調控方面起著重要的作用，現已推廣到真核生物的基因調控領域中。隨著基因工程技術日新月異的發展，報告基因這一探路者的作用會更明顯。

最常用的報告基因大多是編碼抗生素抗性蛋白的基因，通過檢查產物是否具有抗生素的抗性來確定基因的表達情況。

氯霉素乙酰基轉移酶cat：該報告基因來源于大腸桿菌轉位子9，是第1個用于檢測細胞內轉錄活性的報告基因。氯霉素乙酰基轉移酶可催化乙酰coa的乙酰基轉移到氯霉素3羥基，而使氯霉素解毒。cat在哺乳細胞無內源性表達，性質穩定，半衰期較短，適于瞬時表達研究。可用同位素、熒光素和酶聯免疫吸附測定檢測其活性。也可進行蛋白質印跡和免疫組織化學分析。cat與其他報告基因相比，線性范圍較窄，靈敏性較低。

β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大腸桿菌lacz基因編碼。可催化半乳糖苷水解。最大優勢是易于用免疫組織化學法觀測其原位表達，是最常用的監測轉染率的報道基因之一。以鄰-硝基苯-β-d-半乳吡喃糖苷onpg為底物可用標準的比色法檢測酶活性，其檢測動力學范圍為6個數量級。氯酚紅-β-d-半乳吡喃糖苷cprg是另一個可用比色法檢測酶活性的底物，其靈敏度比onpg高近10倍。以mug和熒光素二半乳糖苷fdg為底物則可用熒光法檢測其活性。此法可檢測單個細胞的酶活性，并可用于流式細胞學facs分析。如以二氧雜環丁烷為底物，可用化學發光法檢測酶活性，其檢測動力學范圍最大，靈敏度最高，與用生物發光法檢測熒光素酶活性的靈敏度相似。

熒光素酶是能夠催化不同底物氧化發光的一類酶。哺乳細胞無內源性熒光素酶。最常用的熒光素酶有細菌熒光素酶、螢火蟲熒光素酶和renilla熒光素酶。細菌熒光素酶對熱敏感，因此在哺乳細胞的應用中受到限制。螢火蟲熒光素酶靈敏度高。檢測線性范圍寬達78個數量級，是最常用于哺乳細胞的報道基因。用熒光比色計即可檢測酶活性，因而適用于高通量篩選。隨著具有膜通透性和光裂解作用的螢火蟲熒光素酶的應用，無需裂解細胞即可檢測酶活性。renilla熒光素酶催化腸腔素氧化，產物可透過生物膜，可能是最適用于活細胞的報告分子。將熒光素酶報告基因載體轉染到細胞中，可用熒光素酶檢測系統靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達。自1986年起，螢火蟲熒光素酶基因被用作測定基因表達的報告基因，獲得了廣泛的應用ga公司的pgl3及pgl2系列載體，含sv40啟動子及增強子的不同組合，有助于分析dna片段的轉錄活性。

“主人，成功了！”

不知道過了多久，墨蓮人恭敬地對李安道。

李安滿意地看著自己的身體，然后進入了這個軀體之中！未完待續

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